本文由
液相色谱仪厂家来讲述其操作方法:
一、打开检测器、系统控制器、计算机、采集器的电源
检测器、系统控制器需要有一个预热过程(要等待30分钟左右)
二、样品分析方案的建立
双击电脑屏幕上的“HS2000色谱工作站”——在窗口上方的菜单栏中点击“样品”——“新样品”——A通道,会发现软件窗口左上角出现“样品”,左键点击“样品”,按提示填写所需内容。
a. 若需知道样品中各组分的百分比,选择“归一法”直接点击“完成”,方案即建立,等待液相进样后采集数据;
b. 若需知道样品中各组分的含量,选择“外标法”,需先建立校正曲线,点击“完成”后,等待液相进样后采集数据。数据采集结束后,点击“采样结束”——确认——选定目标峰——赋予组分名——查看校正曲线;在“确认”窗口中,选择“检测样品”,再“确认”,即可检测未知样品的已知组分的含量。
三、检测器的设定
在检测器控制器面板上,按上下方向键选择波长和灵敏度,输入需要的数值,按“Enter”键确认。
四、系统控制的设定
等度分析:按“direct”设定A、B、C、D流动相的百分比,直接输入“flow rate”(0.8-1.5ml/min),按Enter 即可。
梯度分析:按“program method”, 编辑梯度洗脱的程序,按“save”,保存到“program table”(1-15)中,按“operate method”, 输入你在“program table”中所保留的数字(1-15),再按“operate method”即可。
五、色谱泵和色谱柱的清洗
色谱泵和色谱柱的清洗要用梯度清洗,保证色谱泵和色谱柱内无污染物。
六、排气和进样
排气:若发现流动相输液管中有气泡或压力不稳定,将抽液阀调至“ draw”处,用注射器抽液直至气泡消失,之后将此阀调至“run”位。如长久不用,打开参考阀,排液10分钟。高液相开机后,一般都需要排液和抽液,以清除进液管道及泵中的空气。
进样: 用制备色谱(Semi-Prep)和分析色谱(Analytical)的控制阀,即高液相右下角的一个黑色旋钮,选择所需分析类型。如选择了分析型(Analytical)色谱分析,将分析旋钮调至“Load”位,用注射器注射一定量的溶剂,再将旋钮调至“Inject”位。此时,即可观察色谱分析的采集图谱。
七、重复步骤五的操作,防止色谱泵和色谱柱的污染
操作结束后详细填写设备使用记录